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보고서설명
Ⅰ. 목적
생명현상과 생물체를 이루는 중요한 구성요소 중 하나인 단백질과 탄수화물을 발색반응을 이용하여 화학적으로 검출하여 본다.


Ⅱ. 원리
1. 단백질
1) 단백질
본문일부/목차
단백질 검출
1) 밀롱반응(Millons reaction)
- 시료에 단백질이 들어있는 경우 백색 침전이 생기고, 60-70℃로 가열하면 적갈색(자
색)으로 변한다. 이 반응은 아미노산인 티로신, 디옥시페닐알라닌 등의 하이드록시페닐기
(-C6H4OH)의 존재에 의한 것으로 페놀 고리가 수은화합물을 형성하고 아질산에 의하여
질소화되어 강하게 착색된 수은 착염 된다. 따라서 단백질이 아닌 페놀이나 살리실산에
도 발색한다.
2) 크산토프로테인반응(Xanthoprotein reaction)
- 벤젠고리의 니트로화 반응(-NO2)을 이용한다.
- 방향족 아미노산 등을 가진 단백질들은 진한 질산에 의해 니트로화합물을 형성하면서
황색으로 변한다. 이러한 니트로화합물의 알칼리 금속염은 짙은 주황색을 나타낸다.
- 티로신, 페닐알라닌, 트립토판 등의 벤젠고리를 가진 아미노산에 반응한다.
3) 뷰렛반응(Biuret reaction)
- 뷰렛반응 시약 속에는 2가의 구리이온(Cu2+)이 들어 있기 때문에 푸른색을 띤다.
시약이 단백질과 만나면 보라색으로 색이 변하는 성질을 이용한다. 색이 변하는 이유는
펩티드결합이 두개 이상 존재하는 구조를 뷰렛이라 하는데, 이 뷰렛구조가 2가의 구리
이온(Cu2+)과 반응하여 보라색의 착화합물을 형성하기 때문이다.
4) 닌히드린반응(Ninhydrin reaction)
- α-amino산, 펩티드 및 단백질은 pH 4-8에서 Ninhydrin과 함께 100℃로 가열할 때
착색물이 생성된다. Ninhydrin은 아미노
산의 1차 아민그룹과 반응하여 청자색을
나타내어 아미노산의 발색시약으로 사용
되어진다. 2차 아민그룹을 가지는 프롤린
의 경우 청자색이 아닌 주홍색을 나타낸
다. 이 반응은 매우 예민하여 amino acid
및 단백질의 확인반응으로 널리 사용되고
아미노산의 정량에도 이용되고 있다.
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#생명과학

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