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자연과학계열
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실험 15주차_플라스미드 DNA 분리 결과 Report
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실험 15주차_플라스미드 DNA 분리.hwp
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등록인 nav230925191729
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등록/수정일 23.09.25 / 23.09.25
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- 박테리아에서 플라스미드를 정제하는 실험으로 pET-41a라고 하는 플라스미드를 형질전환시킨 박테리아를 이용해 이를 분리하는 실험
- 본문일부/목차
- Ⅰ. 기본정보
Ⅱ. 서론 (Introduction)
1. 플라스미드 (Plasmid) DNA
2. Plasmid DNA 분리
3. Plasmid DNA 정제
Ⅲ. 실험재료 및 방법 (Materials & Methods)
1. 실험재료(Materials)
2. 실험 방법(Methods)
Ⅳ. 실험결과 및 결론 (Data and Results)
Ⅴ. 고찰 (Discssion)
Ⅵ. 참고 문헌 (Reforence)
...................................................................
1. 플라스미드 (Plasmid) DNA
플라스미드는 외부염색체 DNA분자를 작은 염색체로 전이 이동시키는 것이다. 정의에 따라 플라스미드는 복제단위(replicon)로써 외부염색체 상태에서 안정적으로 유전되는(특별한 분리 없이 유지되는)물질 이다. 전부는 아니지만 대개의 플라스미드는 세포의 생존에 꼭 필수적인 것은 아니다. 그러나 항생제가 존재하는 여러 경우에서는 생존에 필수적인 존재가 되기도 한다.
Plasmid DNA란 염색체 밖에 존재하는 DNA(extrachromosomal circular DNA)이다. Plasmid DNA는 그 자체 내에 replication origin을 가지고 있어서 박테리아 내에서 염색체 DNA 복제와 상관없이 독자적으로 복제되는 특징이 있다. 박테리아의 항생제에 대한 내성이 한 세포에서 다른 세포로 옮겨질 때 plasmid를 통해 이루어진다고 알려진 후 항생제에 대한 유전자뿐 아니라 항생제 함성이나 독성물질의 합성, 질소고정 및 분해, 여러 효소들에 대한 유전자를 함께 가지고 있음이 밝혀졌다.
Plasmid는 한 세포에서 다른 세포로 옮겨갈 수 있는 성질을 지니고 있으므로 유전자를 옮기는 운반자 혹은 벡터(vector)로 작용한다. 외부에서 연구하고자 하는 DNA 조각을 plasmid에 삽입하여 연결시킨 후 박테리아에 넣어주면 이 형질전환된 세포 내에서 DNA는 독자적으로 복제되므로 DNA 조각을 복제하는 vector로 이용될 수 있다.
분자유전학 실험에 사용되는 plasmid는 자연계에 존재하는 plasmid의 특성 부위를 조합하여 만든 plasmid가 이용된다, 이러한 plasmid는 작고 활성이 높은 relaxed replication origin을 가지고 있으며 적어도 항생제 내성에 대한 한 개의 유전자를 지니고 있다. 또한 이들 plasmid 내에는 한 가지 제한효소에 의해 단지 한 군데만 절단될 수 있는 부위를 여러 개 가지고 있으므로 실험실 내에서의 조작을 쉽게 해주고 있다.
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