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  • 자연과학계열
  • [생물학 실험] 단백질의 정량

  • 단백질의 정량.hwp
  • 등록인 msr1997
  • 등록/수정일 21.03.01 / 21.03.01
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생물학 및 실험 과목에서 A+ 받았던 레포트입니다.

사용한 실험 방법에 대한 이론적인 배경 설명,
실험결과에 대한 해석,
예상결과에 다른 결과가 나온 이유에 대한 고찰,
수정방안 등을 위주로 작성하였습니다.

유용하게 사용하시길 바랍니다.
본문일부/목차
Ⅰ. 실험방법
1) 15ml tube에 단백질의 양을 모르는 시료(milk)를 증류수 (dH20)를 이용, serial dilution 하여 다음과 같이 희석하여 제조한다. 마지막 부피가 1ml이 되도록 희석한다.

Sample No
A(1/10)
B(1/100)
C(1/1000)
Sample
-
-
-
dH2O
900㎕
990㎕
999㎕
Milk
100㎕
10㎕
1㎕
Total
1,000㎕
1,000㎕
1,000㎕


2) 각각의 희석된 시료를 1.5ml 시험관(Eppendorf tube) 에 50㎕씩 넣는다.

3) 단백질의 양을 알고 있는 Standard solution (1mg/ml BSA, bovine serum albumin)을 1.5ml tube에 다음과 같이 각각 넣는다.

Standard No.
1
2
3
4
5
dH2O
1000㎕
900㎕
800㎕
600㎕
200㎕
1mg/ml BSA
0㎕
100㎕
200㎕
400㎕
800㎕
Total
1000㎕
1000㎕
1000㎕
1000㎕
1000㎕


4) 큐벳에 Bradford reagent 800㎕ 를 넣고 각각의 Standard tube와 시료 (희석된 우유)를 2㎕ 씩 넣어 잘 섞어준 뒤 발색이 되도록 기다린다.

5) 595nm의 파장에서 standard solution 과 시료의 흡광도를 측정하여 기록하고, 측정값을 이용하여 BSA standard curve를 작성한 후 (y축 : absorbance, x축 : protein 농도, mg/ml) 각 sample의 흡광도 값을 찾아서 sample들의 protein 농도를 추정한다.
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