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  • 공학,기술계열

  • 유전공학 - Transformation의 원리와 종류

  • 유전공학 - Transformatio.hwp
  • 등록인 leewk2547
  • 등록/수정일 13.05.09 / 13.05.09
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보고서설명
E.coli는 linear 또는 circular DNA를 받아들일 수 있는데, 이러한 과정을 transformation이라 하며 다음과 같은 단계를 거쳐 이루어진다. E.coli cell이 DNA를 uptake 할 수 있는 상태(competent)로 만들어 주기위해 E.coli cell을 Ca과 같은 multivalent ion의 존재 하에 0℃에서 incubation한다.
본문일부/목차
Transformation의 종류
가) 전기 충격법(Electroporation)
이 방법은 전기충격을 극히 짧은 시간동안 원형질체에 가하여 세포에 구멍을 뚫어 외래 DNA를 세포내로 넣는 것인데 장치(Electroporator)의 종류에 따라 약간의 차이는 있으나 원리는 같으며 샘플의 종류 및 장치의 종류에 따라 경험적으로 전압 및 시간들을 조절 사용하면 된다. 전기충격에 의한 유전자도입은 원래 Electric field mediated transformation이 정확한 용어이나 Electroporation이라고 쓰이고 있으며 비슷한 용어로 Electroinfection 그리고 Electrotransfection이라는 용어도 있다.
이 방법은 식물뿐만 아니라 박테리아, 효모, 진균 그리고 동물세포에까지 널리 적용되고 있다. 그러나 세포종류가 달라짐에 따라 다른 전기적 조건을 설정해야 하며 식물에서는 원형질체(Protoplast)를 재료로 사용하고 있다.

(나) Agrobacterium 이용 방법
Agrobacterium은 토양중에 있는 Gram(-) 박테리아로써 식물의 상처부위에 침입하여 Corwn gall이라는 종양이나 Hairy rout를 형성하며 식물에 대해 광범위한 기주범위를 가지고 있다. 특이한 점은 이 박테리아가 가지고 있는 Ti plasmid나 Riplasmid에 특별한 DNA부분(T-DNA)이 식물체에 감염과 동시에 자연적으로 식물체의 genome속으로 들어가서 발현되다.
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